dna的粗提取与鉴定实验样本(附实验关键)

生物大分子提取的基本思想是选择不同物理或化学性质的生物大分子,采用一定的物理或化学方法进行分离。对于dna的粗提取而言,就是要利用dna与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取dna,去除其他成分。

dna的粗提取与鉴定实验样本

dna的粗提取与鉴定实验材料:

dna粗提取和鉴定实验的步骤是取两个20ml试管dna粗提取和鉴定实验。每种添加物质的量浓度为2mol/L的nacl溶液为5ml。将丝状物放入试管中,用玻璃棒搅拌,溶解丝状物。然后,向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有dna的溶液是否变蓝。
1.材料制备
0.1G/ml柠檬酸钠100ml
500ml烧杯玻璃棒搅拌1000r/min离心2min吸入上清液。
活鸡血180ml
也就是鸡血细胞液(也可以把上面的烧杯放在冰箱里,让鸡血细胞自行沉淀一天)
2.方法步骤
取血细胞液5-10ml+20ml蒸馏水,玻璃棒沿一个方向快速搅拌
(1)提取含有dna和蛋白质等其他核物质的血细胞核物质纱布过滤。
(2)溶解核内dna:滤液+2mol/LNACl溶液40ml,玻璃棒沿一个方向搅拌。
(3)沉淀含有dna的粘性物质:将蒸馏水慢慢加入上述溶液中,沿一个方向轻轻搅拌,出现丝状物。当丝状物不再增加时,停止加水(此时NaCl溶液相当于稀释到0.14mol/L)
(4)过滤含有dna的粘性物质:用多层纱布过滤,在纱布上留下含有dna的粘性物质。
(5)(纱布上的)dna粘稠物再溶解:20ml2mol/LNaCl溶液50ml烧杯,上述粘稠物缓慢搅拌3min。
(6)过滤含有dna的2mol/LNaCl溶液:过滤含有dna的2层纱布。
(7)提取含杂质少的dna:以上溶液+95%酒精,慢慢搅拌,出现乳白色丝状物,用玻璃棒卷起丝状物。
(8进行dna鉴定。

dna的粗提取与鉴定实验样本(附实验关键)

实验关键:

本实验成功的关键是获取较纯净的dna,因此应注意:
1.充分搅拌鸡血细胞液。dna存在于鸡血细胞核中。将鸡血细胞与蒸馏水混合以后,应用
将玻璃棒向上释放dna,快速搅拌玻璃棒,加速血细胞破裂。
2.沉淀dna必须用冷酒精。在进行实验之前,必须准备大量的95%酒精,并至少储存24小时(低于5℃)。
3.将含有悬浮物的溶液正确搅拌。为了获得更完整的dna分子,在第(3),(5)步骤中,玻璃棒不要直接插入烧杯底部,并轻轻搅拌。步骤(7),将玻璃棒插入烧杯溶液中间,用手慢慢转动5-10分钟。

(1)

相关文章

微信咨询
微信咨询
咨询电话

全国咨询电话:
135 3989 0008

分享本页
返回顶部