常用的基因载体有哪些(运载体具有四个条件)

想必大家都知道,“基因剪刀”指CRISPR基因编辑技术,用它能像在电脑上编辑文章一样,精确查找一串代码在基因组中的位置,进行删除或修改。那么,你知道什么是基因运载体吗?

在基因操作过程中使用运载体有两个目的:

一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;
二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制(称为克隆)。

常用的基因载体有哪些

常用的运载体主要有两类:

一类是细菌细胞质的质粒,它是一种相对分子质量较小、独立于拟核区dna之外的环状dna(一般有1~200 kb左右,kb为千碱基对),有的一个细菌中有一个,有的一个细菌中有多个。质粒能通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移,可以独立复制,也可整合到细菌拟核dna中,随着拟核dna的复制而复制。
另一类运载体是噬菌体或某些病毒等。
除以上两类外,人们还在不断寻找新的运载体,如叶绿体或线粒体dna等也有可能成为运载体。

作为运载体必须具有四个条件:

①在受体细胞中能保存下来并能大量复制;
②有一个至多个限制酶切点,而且每种酶切位点最好只有一个,如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的dna插入;
③有一定的标记基因,便于进行筛选。如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因。
④对受体细胞无害。
一般来说,天然运载体往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行人工改建。现今实际所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。
值得一提的是,运载体(Vector),一是用它作为运载工具,将目的基因转移到受体细胞中去;二是利用它在受体细胞内对目的基因进行大量的复制(称为克隆)。最终在受体细胞中表达大量目的基因产物,经分离纯化被人们利用。

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